Resumo

tem sido relatado que abundante óxido nítrico conteúdo nas células endoteliais, pode aumentar o desempenho do exercício. O objectivo deste estudo foi avaliar os potenciais efeitos benéficos de um extracto combinado constituído por L-arginina, L-glutamina, vitamina C, vitamina E, ácido fólico e extracto de chá verde (LVFG) sobre o teor de óxido nítrico para diminuir a fadiga do exercício. O ICR masculino (Institute of Cancer Research) mice foi aleatoriamente dividido em 4 grupos e administrado por via oral durante 4 semanas. A suplementação de 4 semanas com LVFG aumentou significativamente o teor sérico de óxido nítrico nos grupos LVFG-1X e LVFG-2X. A actividade antifatiga e o desempenho do exercício foram avaliados utilizando a força de aderência anterior, o teste de natação exaustivo e os níveis séricos de lactato, amoníaco, glucose e creatina cinase (CK) após um exercício de natação aguda. A suplementação com LVFG melhorou significativamente o desempenho do exercício e o teor de óxido nítrico, diminuindo a actividade sérica de amoníaco e de CK em função da dose, após um teste de natação exaustivo. As propriedades antifatiga do LVFG parecem manifestar-se preservando o armazenamento de energia (como glicose no sangue) e aumentando o teor de óxido nítrico. Em conjunto, os nossos resultados mostram que o LVFG pode ter potencial para aliviar a fadiga física devido ao seu efeito farmacológico de aumentar o teor sérico de óxido nítrico.

1. Introdução O óxido nítrico (NO) é conhecido como o “fator relaxante derivado do endotélio” para a manutenção da homeostase cardiovascular. As sintetases de óxido nítrico (NOS) são enzimas contendo grupos prostéticos heme, que são responsáveis pela síntese de NO de L-arginina . Ao longo dos anos, tornou-se cada vez mais evidente que a diminuição da biodisponibilidade do NO desempenha um papel em várias doenças cardiovasculares, tais como aterosclerose e hipertensão . É bem conhecido que o exercício causa um aumento na produção de oxigênio reativo (ROS), particularmente no músculo esquelético ativo. Não foi proposto para proteger contra danos celulares, muitas vezes com a formação concomitante de superóxido/peróxido de hidrogênio. Assim, assume-se frequentemente uma relação sinérgica entre os efeitos citotóxicos do óxido nítrico e estas espécies de oxigénio activo . Um estudo anterior demonstrou que o efeito do exercício aeróbico na função endotelial está principalmente relacionado com a melhoria da ausência de biodisponibilidade devido ao aumento da produção e/ou diminuição da inactivação por superóxido . Alguns estudos sugerem que a suplementação com L-arginina pode reduzir a lesão do músculo esquelético após isquemia-reperfusão e reduzir o stress oxidativo e a inflamação após um exercício exaustivo em ratos jovens e idosos . Tanto quanto é do nosso conhecimento, a investigação até à data demonstrou que é difícil melhorar o desempenho do exercício utilizando apenas L-arginina como suplemento nutricional ergogénico . Isto está de acordo com uma hipótese anterior de que é o efeito sinérgico de vários ingredientes em suplementos nutricionais esportivos que podem ser responsáveis por melhorias relatadas no desempenho do exercício . Como um componente de proteínas, L-glutamina é o aminoácido livre mais abundante no músculo humano e plasma e é também um veículo importante para o transporte de nitrogênio . Estudos anteriores alegaram que os suplementos de glutamina podem beneficiar os atletas, aumentando a capacidade de choque e melhorando o desempenho de exercício de alta intensidade .Tanto a L-arginina como a L-glutamina são aminoácidos não essenciais. Embora eles não sejam necessários para estimular a síntese de proteínas musculares , isso não significa que eles não são importantes para maximizar a adaptação de treinamento em atletas. O consumo de bebidas esportivas líquidas de pré-exercício ganhou popularidade ao longo dos últimos anos. Pesquisas demonstraram que as bebidas energéticas estão entre os suplementos dietéticos mais populares consumidos pelos jovens nos Estados Unidos . Em bebidas energéticas comercialmente disponíveis, vitamina C, vitamina E e extrato de chá verde estão entre os ingredientes mais comuns. Os principais objectivos da ingestão de bebidas energéticas incluem a melhoria dos treinos, a melhoria do desempenho desportivo e a facilitação de uma adaptação mais rápida à formação . Por outro lado, a ingestão de ácido fólico tem demonstrado melhorar o fluxo sanguíneo através da condutância vascular aumentada no músculo esquelético do exercício de seres humanos idosos .

muitos investigadores estão interessados em utilizar os efeitos sinérgicos de vários ingredientes para atrasar a fadiga e acelerar a eliminação de metabolitos relacionados com a fadiga . Até à data, relativamente poucos estudos abordaram diretamente a atividade antifatiga da L-arginina, L-glutamina, vitamina C, vitamina E, ácido fólico e complexo de extrato de chá verde (LVFG). No presente estudo, utilizamos a nossa plataforma in vivo estabelecida para avaliar os efeitos da suplementação LVFG nas actividades antifatiga e nos níveis séricos de óxido nítrico.

2. Métodos

2.1. A preparação do complexo LVFG

um suplemento dietético disponível comercialmente constituído por LVFG (L-arginina, L-glutamina, vitamina C, vitamina E, extracto de chá verde e complexo de ácido fólico) foi fornecida pela Pemey Bio-medical Co., Ltd. (Taichung, Taiwan). O LVFG continha 4 kcal / g com% (wt/wt) de constituintes como se segue: 100% de proteínas, 0% de gordura total, 0% de gordura saturada, 0% de gordura trans, 0% de hidratos de carbono e 0, 0002% de sódio. As quantidades de L-arginina, L-glutamina, vitamina C, vitamina E, extrato de chá verde, e ácido fólico no LVFG foram 350 mg/g, 100 mg/g, 25 mg/g, 5 mg/g, 15 mg/g, e de 5 mg/g, respectivamente. O suplemento foi armazenado à temperatura ambiente e mantido em um armário escuro e seco. Foi preparado recentemente antes de cada administração diária.

2.2. Animais e design de experimentos

ratos ICR machos (8 semanas de idade) cultivados em condições específicas livres de patógenos foram comprados de BioLASCO (Yi-Lan, Taiwan). Todos os ratinhos receberam uma dieta laboratorial padrão (No. 5001; PMI Nutrition International, Brentwood, MO, USA) e água destilada ad libitum e foram alojados em um ciclo de luz de 12 horas/12 horas escuro à temperatura ambiente (22°C ± 1°C) e 50% -60% de umidade. O Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) da National Taiwan Sport University (NTSU) inspeccionou todas as experiências com animais, e este estudo obedeceu às directrizes do protocolo IACUC-10514 aprovado pelo Comité de Ética da IACUC. A dose 1X de LVFG utilizada no ser humano é normalmente de 3000 mg por dia. A 1X mouse dose (615 mg/kg) foi utilizado foi convertido a partir de um ser humano-dose equivalente (BPE) com base na área de superfície corporal de acordo com o US Food and Drug Administration fórmula: supondo que um humano peso de 60 kg, o BPE 3000 (mg)/60 (kg) = 50 × 12.3 = 615 mg/kg; o coeficiente de conversão 12.3 foi utilizado para explicar as diferenças na área de superfície corporal entre ratos e humanos, como descrito anteriormente . No total, 32 ratos foram distribuídos aleatoriamente a 4 grupos (8 ratos/grupo) para a administração oral diária do veículo/LVFG durante 4 semanas. Os 4 grupos foram os grupos veículo, 615 mg/kg (LVFG-1X), 1230 mg/kg (LVFG-2X) e 3075 mg/kg (LVFG-5X). O grupo de veículos recebeu o volume equivalente de solução com base no peso corporal individual (PC). Os ratos foram alojados aleatoriamente em grupos de 4 por gaiola.

2.3. A detecção do teor sérico de óxido nítrico

o Kit de ensaio Total de óxido nítrico (termo Fisher, número de catálogo: EMSNOTOT, Áustria) foi utilizado para a detecção do teor sérico de óxido nítrico. O kit usa a enzima nitrate reductase para converter nitrato (NO3−) em nitrito (NO2−). Nitrito é detectado como um corante azo colorido da reação de Griess que absorve luz visível a 540 nm. O óxido nítrico total contribuído com nitrato e nitrito num sistema é medido como nitrito após a conversão de todos os nitratos em nitrito .

2.4. Força de aderência dianteira e natação exaustiva

um sistema de testes de baixa força (modelo-RX-5, Engenharia Aikoh, Nagoya, Japão) foi descrito em nosso estudo anterior . O ensaio de natação à exaustão envolve cargas correspondentes a 5% do peso corporal do rato fixado às caudas para avaliar os tempos de resistência, tal como descrito anteriormente .

2.5. Índices bioquímicos associados à fadiga

os efeitos do LVFG no lactato sérico, amoníaco, níveis de glucose e actividade CK foram avaliados após exercício. Uma hora após a última administração, foi realizado um teste de natação de 15 minutos sem carga de peso. Os níveis de lactato, amoníaco, glucose e actividade CK no soro foram determinados com um autoanalisador (Hitachi 7060, Hitachi, Tóquio, Japão). As outras variáveis bioquímicas, como mostrado na Tabela 1, foram medidas com um autoanalyzer (Hitachi 7080) após 40 semanas de suplementação LVFG sem exercício.

Parameter Vehicle LVFG -2X LVFG-5X LVFG-1X Trend analysis
AST (U/L) 85 ± 6 85 ± 8 90 ± 6 75 ± 3 0.3792
ALT (U/L) 53 ± 5 54 ± 5 46 ± 4 47 ± 3 0.3529
BUN (mg/dL) 24.4 ± 0.5 25.3 ± 1.3 27.4 ± 0.8 31.7 ± 0.9 <0.0001
Creatinina (mg/dL) 0.32 ± 0.02 0.35 ± 0.02 0.31 ± 0.01 0.32 ± 0.01 0.4556
CHUVEIRO (mg/dL) 1.41 ± 0.09 0.84 ± 0.07 0.78 ± 0.04 0.73 ± 0.03 <0.0001
TC (mg/dL) 162 c 5b 143 c 4a 162 c 4b 174 c 4b 0.0287
TG (mg/dL) 179pel 6b 168pat 9b 162pir6b 140ped6a <0.0001
a TERAPIA SE:) 5.5 ± 0.2 um 6.3 mostarda 0.1 b 6.3 laranja 0.1 b 6.2 repe 0.1 b 0.0372
Terapia (g/dL )) 3.6 ± 0.1 3.6 ± 0.0 3.6 ± 0.0 3.6 ± 0.0 0.4637
Glicose (mg/dL) 148 ± 4 150 ± 4 153 ± 3 148 ± 7 0.9310
Valores são média ± SEM, n = 8 ratos por grupo. Os valores na mesma linha com diferentes Letras (A, b, c) diferem significativamente () por uma ANOVA de Sentido Único. AST, aspartato aminotransferase; ALT, alanina aminotransferase; BUN, azoto ureico sanguíneo; UA, ácido úrico; TC, colesterol total; TG, triacilglicerol; TP, proteína total.
Tabela 1
análise Bioquímica de ratos submetidos a LVFG suplementação no final do estudo.

2.6. Determinação do glicogénio tecidular e Peso do órgão Visceral

a forma armazenada de glucose é o glicogénio, que existe principalmente nos tecidos hepático e muscular. Os tecidos do fígado e do músculo foram excisados após a eutanásia dos ratinhos e pesados para análise do conteúdo de glicogénio, tal como descrito anteriormente .

2.7. Após o sacrifício dos ratinhos, colheram-se e fixaram-se em 10% formalina diferentes tecidos de coloração histológica dos tecidos

. Após a fixação de formalina, os tecidos foram incorporados em parafina e cortados em fatias de 4 µm de espessura para avaliações histológicas e patológicas. As seções de tecido foram então manchadas com hematoxilina e eosina e examinadas em um microscópio de luz com uma câmera CCD (BX-51, Olympus, Tóquio, Japão) por um patologista clínico.

2.8. Análise estatística

todos os dados são expressos em média ± SEM. As diferenças estatísticas entre os grupos foram analisadas por uma análise de Sentido Único da variância (ANOVA), tendo sido utilizado o teste de Cochran-Armitage para a análise das tendências do efeito da dose. Todas as estatísticas foram calculadas na versão 18.0 do SPSS (SPSS, Chicago, IL, EUA), e os valores < 0,05 foram considerados estatisticamente significativos.

3. Resultados

3.1. Dados morfológicos

os dados morfológicos de cada grupo experimental estão resumidos na Tabela 2. Não houve diferenças significativas nos grupos BW inicial ou final ou na ingestão diária de alimentos e água entre o veículo, LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X. Observamos que a suplementação do LVFG não teve efeito na ingestão de água e dieta, com o BW em cada grupo aumentando constantemente ao longo do período experimental (dados não mostrados). Também não foram observadas diferenças significativas no fígado, rim, coração, pulmão, tecido adiposo epididimal (EFP), e pesos musculares entre os grupos. No entanto, descobrimos que o peso do tecido adiposo castanho (BAT) era significativamente maior nos grupos LVFG-2X e LVFG-5X (Δ1.13 vezes, e Δ1, 15 vezes, respectivamente) do que no grupo do veículo. Também medimos o efeito do LVFG no peso relativo do tecido. Os pesos das MTD relativos foram mais elevados nos grupos LVFG-2X e LVFG-5X (Δ1, 11 vezes, respectivamente) do que nos grupos do veículo.

Característica LVFG-1X LVFG-2X LVFG-5X análise de Tendência
Inicial de peso CORPORAL (g) 34.59 ± 0.77 35.04 ± 0.78 35.31 ± 0.40 34.64 ± 0.67 0.8701
Final de peso CORPORAL (g) 36.91 ± 0.60 37.36 ± 0.74 37.38 ± 0.49 37.73 ± 0.51 0.2850
A ingestão alimentar (g/dia) 6.18 ± 0.07 6.12 ± 0.11 6.18 ± 0.04 6.16 ± 0.06 0.5236
a ingestão de Água (g/dia/) 6.77 ± 0.06 6.79 ± 0.10 6.82 ± 0.12 6.79 ± 0.09 0.2626
Liver (g) 2.05 ± 0.02 2.05 ± 0.06 2.09 ± 0.02 2.04 ± 0.05 0.7861
Kidney (g) 0.57 ± 0.01 0.59 ± 0.03 0.56 ± 0.02 0.57 ± 0.01 0.9738
EFP(g) 0.54 ± 0.07 0.50 ± 0.05 0.53 ± 0.02 0.53 ± 0.02 0.1256
Heart (g) 0.23 ± 0.01 0.23 ± 0.01 0.23 ± 0.01 0.23 ± 0.01 0.4543
Pulmão (g) 0.22 ± 0.00 0.21 ± 0.01 0.22 ± 0.00 0.22 ± 0.01 0.8911
Músculo (g) 0.39 ± 0.01 0.38 ± 0.01 0.39 ± 0.00 0.38 ± 0.01 0.8184
BAT (g) 0.11 ± 0.00 um 0.11 ± 0.00 um 0.13 ± 0.00 b 0.13 ± 0.01 b <0.0001
Relativa do peso do fígado (%) 5.56 ± 0.10 5.51 ± 0.16 5.61 ± 0.10 5.40 ± 0.08 0.5681
em relação peso renal (%) 1.54 ± 0.03 1.57 ± 0.07 1.50 ± 1.52 1.52 ± 0.03 0.5037
Em relação a participação financeira dos trabalhadores peso (%) 1.46 ± 0.17 1.33 ± 0.13 1.42 ± 0.06 1.41 ± 0.06 0.2622
em relação coração de peso (%) 0.63 ± 0.02 0.61 ± 0.02 0.62 ± 0.02 0.59 ± 0.02 0.1839
Relativo do pulmão de peso (%) 0.58 ± 0.01 0.57 ± 0.02 0.58 ± 0.01 0.58 ± 0.02 0.8147
em relação a massa muscular (%) 1.05 ± 0.02 1.01 ± 0.04 1.05 ± 0.02 1.01 ± 0.03 0.5788
em relação BASTÃO de peso 0.30 ± 0,01 a 0.30 ± 0,01 a 0.34 ± 0.01 b 0.34 ± 0.01 b 0.0008
Tabela 2
características Gerais dos ratos com LVFG suplementação.

3.2. Efeito da suplementação com LVFG sobre o desempenho do exercício e os níveis séricos de óxido nítrico (NO)

, tal como demonstrado na Figura 1(A), a força de preensão dianteira foi mais elevada nos grupos LVFG-1x, LVFG-2X e LVFG-5X do que no grupo do veículo. A análise das tendências mostrou que a força de aderência aumentou em função da dose com o LVFG (). Normalmente, um programa de treinamento regulamentado é necessário para obter elevação na força de aderência; no entanto, nossos resultados indicaram que o tratamento LVFG foi capaz de melhorar a força de aderência mesmo sem intervenção de treinamento. O tempo de natação foi maior em todos os grupos de LVFG do que no grupo de veículos () [Figura 1 (b)]. Assim, o tempo de natação no LVFG-1X, LVFG-2X, e LVFG-5X grupos aumentou significativamente (Δ2.78 vezes, Δ2.89-fold, e Δ2.25-dobre, respectivamente), em comparação com o grupo do veículo. Além disso, foi observado um efeito significativo dependente da dose no tempo de natação (). Como demonstrado na Figura 1 (C), os níveis séricos de óxido nítrico no veículo, LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X foram 5.93 ± 0.24, 7.23 ± 0.20, 7.21 ± 0.49, e 6,60 ± 0,51 µmol / L, respectivamente. Os níveis séricos de óxido nítrico foram significativamente mais elevados nos grupos LVFG-1x e LVFG-2X (, respectivamente) do que nos grupos do veículo.

(a)
(a)
(b)
(b)
(c)
(c)

(a)
(a)(b)
(b)(c)
(c)

Figure 1
Effect of LVFG supplementation exercise performance. (a) Forelimb grip strength. (b) Swimming exercise performance: os ratos foram submetidos a um exaustivo exercício de natação com carga equivalente a 5% do mouse peso do corpo ligado a sua cauda, e o exercício de teste de desempenho masculino ICR ratos foram pré-tratados com veículo ou 615, 1230, e 3075 mg/kg LVFG (1X, 2X, 5X e, respectivamente) antes de se submeter a um ensaio de resistência de aderência e teste de natação de 1 h após a última dose administrada. c) efeito do LVFG sobre o óxido nítrico sérico (NO) em repouso: todos os ratinhos foram sacrificados e examinados para determinar os níveis de óxido nítrico após o tratamento final. Os dados são expressos em média ± SEM Para n = 8 ratinhos em cada grupo. A ANOVA de Sentido Único foi usada para a análise, e diferentes Letras (A, b) indicam diferença significativa em .

3.3. Os níveis bioquímicos após o desafio de Exercício agudo

acumulação de lactato e acidose metabólica são manifestações celulares de fadiga. No presente estudo, os níveis de lactato no veículo, LVFG-1X, LVFG-2X, e LVFG-5X grupos foram 6.5 ± 0.3, 5.5 ± 0.3, 5.2 ± 0.2, e 5,7 ± 0.3 mmol/L, respectivamente. Isto corresponde a diminuições nos grupos LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X (▽-14.86%, ; ▽-19.66%, ; e ▽ – 12.7%, respectivamente) em relação ao grupo de veículos [Figura 2 a)]. Isto sugere que a suplementação com LVFG tem o potencial de aumentar a depuração ou utilização de lactato no sangue durante o exercício.

(a)
(a)
(b)
b)
(c)
(c)
(d)
d)

(a)
(a)(b)
(b)(c)
(c)(d)
d)

Figura 2
Efeitos de LVFG suplementação no soro (a) lactato, (b) a amônia, (c) a glicose, e (d) a creatina quinase (CK) depois de uma crise aguda de exercício desafio. Os ratinhos foram pré-tratados com o veículo 615, 1230 e 3075 mg / kg de LVFG durante 4 semanas. Uma hora após a administração da última dose de tratamento, foi realizado um teste de natação de 15 minutos sem carga de peso. Os dados são expressos em média ± SEM de oito ratos em cada grupo. Colunas com letras diferentes (a, b) diferem significativamente por uma ANOVA de Sentido Único ().

os resíduos azotados da degradação dos aminoácidos são eliminados através da formação de ureia e pequenas quantidades de amoníaco . Os níveis de amoníaco foram significativamente inferiores nos grupos LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X.(▽-33.40%, ; ▽- 39.71%, ; e ▽ – 41.15%, respectivamente) do que os do grupo de veículos [Figura 2(b)]. Na análise das tendências, os níveis séricos de amoníaco diminuíram de forma dependente da dose com o aumento da dose de LVFG (), sugerindo que a suplementação contínua com LVFG durante 4 semanas poderia atenuar a acumulação de amoníaco durante o exercício.O nível de Glicose no sangue é um índice importante de manutenção do desempenho durante o exercício. À medida que o exercício continua, verifica-se um aumento da captação de glucose e uma diminuição da concentração de glucose intramuscular, à medida que a inibição da hexoquinase é aliviada por uma menor concentração de 6-fosfato de glucose (G-6-P). Níveis de glicose sérica foi maior no LVFG-1X, LVFG-2X, e LVFG-5X grupos (Δ1.14-dobre, ; Δ1.17 vezes ; e Δ1.23 vezes, respectivamente) do que aqueles no controle do veículo (Figura 2(c)). A análise das tendências mostrou aumentos dos níveis séricos de glucose dependentes da dose com suplementos de LVFG aumentados ().

volume de exercício invulgarmente elevado pode resultar em níveis aumentados de creatina cinase (CK), indicando lesão muscular e fadiga muscular . O CK sérico é um importante biomarcador clínico para danos musculares, tais como Distrofia muscular, ruptura muscular grave, enfarte do miocárdio, miosite auto-imune e insuficiência renal aguda. Atividade da CK foi mais baixo no LVFG-1X, LVFG-2X, e LVFG-5X grupos (▽-44.21%, ; ▽-46.45%, ; e ▽-48.50%, respectivamente) do que no grupo do veículo (Figura 2(d)). As nossas descobertas sugerem que a suplementação do LVFG pode melhorar a lesão muscular esquelética induzida pelo desafio agudo do exercício. A análise das tendências mostrou que o tratamento com LVFG teve um efeito significativo dependente da dose no nível de CK (). De acordo com estes dados, o fornecimento De L-arginina e L-glutamina pode minimizar os danos musculares.

3.4. Níveis de glicogénio hepático

foram examinados o conteúdo de glicogénio no fígado e nos tecidos musculares dos grupos tratados com ratinhos [Figuras 3 a) e 3 b)]. Os níveis de glicogénio hepático nos grupos do veículo, LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X foram 12.41 ± 1.54, 14.63 ± 1.41, 22.46 ± 1, 99 e 16, 21 ± 1, 61 mg/g de fígado, respectivamente. O grupo LVFG-2X mostrou um nível de glicogénio hepático significativamente mais elevado (Δ1, 81 vezes ) do que o do grupo do veículo. O conteúdo de glicogénio muscular nos grupos LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X mostrou aumentos de 2, 66 vezes (), 2, 66 vezes () e 4, 79 vezes () em relação ao grupo do veículo. A análise das tendências revelou que o tratamento com LVFG teve um efeito significativo dependente da dose nos níveis de glicogénio hepático () e muscular (). Com as doses mais elevadas de LVFG-5X, os resultados também indicaram que o glicogénio hepático não aumentou significativamente, mas o desempenho do exercício foi significativamente elevado com a suplementação de LVFG. Alguns estudos demonstraram um efeito do suplemento de glutamina na promoção da síntese do glicogénio nas primeiras horas de recuperação após o exercício .

(a)
(a)
(b)
b)

(a)
(a)(b)
b)

Figura 3
Efeito de LVFG em (a) e muscular (b) fígado níveis de glicogênio no repouso. Os ratinhos foram pré-tratados com 615, 1230 ou 3075 mg / kg de LVFG durante 4 semanas. Todos os ratinhos foram sacrificados e examinados quanto aos níveis de glicogénio nos tecidos muscular e hepático 1 h após o tratamento final. Os dados são expressos em média ± SEM com n = 8 ratinhos em cada grupo. A ANOVA de Sentido Único foi usada para a análise, e diferentes Letras (A, b) indicam diferença significativa em .

3.5. Marcadores bioquímicos

observou-se que a suplementação de 4 semanas com LVFG aumentou os níveis séricos de óxido nítrico, aumentou o tempo de teste exaustivo e melhorou os indicadores antifatiga, incluindo os níveis de lactato, amônia, glicose e CK. As capacidades de armazenamento do fígado e do glicogénio muscular foram ambas aumentadas pelo LVFG. Outras análises bioquímicas realizadas no final do estudo investigaram se o tratamento de 4 semanas com LVFG afectou outros marcadores bioquímicos em ratinhos saudáveis. Examinámos variáveis bioquímicas relacionadas com o estado de saúde e tecidos e órgãos principais, incluindo o músculo esquelético, coração, rim e pulmão.

os resultados da análise são apresentados no quadro 1. Os níveis de AST, ALT, creatinina, albumina e glicose não diferiram significativamente entre os grupos. No entanto, os níveis séricos de BUN foram mais elevados nos grupos LVFG-2X e LVFG-5X do que nos grupos de veículos. Os níveis totais de proteínas (TP) também foram significativamente mais elevados nos grupos LVFG-1X, LVFG-2X e LVFG-5X, respectivamente. No que se refere ao perfil lipídico, os níveis de colesterol total (TC) foram significativamente inferiores no grupo LVFG-1X (11, 82%), e o triacilglicerol sérico (TG) foi inferior em 21, 68% () no grupo LVFG-5X, em comparação com o grupo do veículo. Os níveis séricos de ácido úrico (UA) dos ratinhos nos grupos LVFG-1X, LVFG-2 e LVFG-5X foram reduzidos em 40.43% (), 44.68% (), e 48,23% (), respectivamente, em comparação com o grupo de veículos.Adicionalmente, os nossos resultados sugerem que a suplementação LVFG pode ter potencial para prevenir acumulação de lípidos através da redução de TC e TG. Um estudo anterior demonstrou que uma dieta enriquecida com L-arginina reduziu os triglicéridos diminuindo os níveis de TC e TG. Também descobrimos que os níveis totais de proteínas foram significativamente aumentados pelo tratamento com LVFG. Os resultados do exame histopatológico dos órgãos principais, incluindo os tecidos do fígado, músculo, coração, rim e pulmão, são apresentados na Figura 4. A observação histológica das secções mostrou que o fígado, músculo, coração, rim, pulmões, EFP e morcego dos ratinhos complementados com LVFG não diferiam dos do grupo do veículo.

(a)
(a)
(b)
b)
(c)
(c)
(d)
d)
(e)
(e)
(f)
(f)

(a)
(a)(b)
(b)(c)
(c)(d)
(d)(e)
(e)(f)
(f)

Figura 4
Efeito de LVFG suplementação sobre a morfologia do (a) fígado, (b) músculo-esquelético, (c) coração, (d) renal, (e) epididymal tecido adiposo e f) tecido adiposo castanho. Os espécimes foram fotografados com um microscópio luminoso (Olympus BX51). Coloração H&e, ampliação: 400×. Barra de escala, 10 µm.

4. Discussão

a nutrição desempenha um papel importante no exercício, treinamento e redução da fadiga. A hidratação adequada e a manutenção eletrolítica, a ingestão energética adequada e a ingestão adequada de proteínas, hidratos de carbono, gordura, vitamina e minerais permitem aos atletas colher os benefícios máximos do exercício. L-arginina e extrato de chá verde ativam crescimento e desenvolvimento de morcegos através de mecanismos envolvendo expressão genética, sinalização de óxido nítrico e síntese de proteínas . Esta ativação tem o potencial de aumentar a oxidação de substratos de energia e reduzir a acreção de gordura branca no corpo. A arginina é necessária para a síntese de proteínas e creatina, e o seu metabolismo resulta na produção de óxido nítrico. Muito pouca evidência científica tem sido relatada para apoiar as alegações relativas à suplementação com arginina, tais como a capacidade de elevar os níveis de óxido nítrico, aumentar o fluxo sanguíneo muscular, e melhorar o desempenho do exercício. Alguns estudos descobriram que a suplementação da arginina isolada não tem efeito no desempenho do exercício . Os resultados do presente estudo sugerem que a suplementação de L-arginina e L-glutamina, em combinação com a vitamina C, vitamina E, ácido fólico, e extrato de chá verde, é capaz de melhorar a composição corporal e o desempenho do exercício. Os nossos dados sugerem que diferentes concentrações de LVFG podem contribuir de forma diferente para as actividades fisiológicas, e a dose de LVFG-2X (1230 mg/kg) pode ser a gama ideal para a capacidade de explosão e resistência. Curiosamente, a L-arginina ou a L-glutamina utilizadas isoladamente não tiveram efeito significativo no desempenho muscular, na composição corporal ou na degradação das proteínas musculares em adultos saudáveis . Em vez disso, o nosso estudo sugere que a suplementação contínua com LVFG durante 4 semanas pode aumentar os níveis de glucose sérica e melhorar a capacidade de absorção de glucose para a actividade antifatiga benéfica.

os atletas podem reduzir significativamente as suas reservas de glicogénio muscular durante o exercício, levando a fadiga muscular . Substituir completamente as reservas de glicogênio muscular antes de uma subsequente Luta de exercício ou competição pode prolongar o tempo até a fadiga e melhorar o desempenho . Nossos dados sugerem que diferentes concentrações de LVFG podem contribuir de forma diferente para melhorar o conteúdo de glicogênio e que uma dose de 1230 mg/kg pode ser a mais adequada para otimizar o conteúdo de fígado e glicogênio muscular. A suplementação LVFG ajudou a aumentar o armazenamento de glicogênio muscular nos ratinhos, levando a uma maior utilização de energia.

durante o exercício, os níveis de óxido nítrico são naturalmente aumentados e mais sangue pode fluir através das artérias e artérias com o objectivo de fornecer oxigénio e substratos de combustível para os músculos esqueléticos que funcionam. Em pesquisas anteriores, foi estabelecido que o exercício induz a expressão iNOS e causa baixas concentrações de óxido nítrico em seres humanos . O exercício físico pesado induz uma resposta imunitária que por sua vez induz a expressão do iNOS . Assim, a concentração de óxido nítrico e a expressão iNOS aumentada são possíveis mecanismos de lesão celular após o exercício.Foi colocada a hipótese de que, elevando os níveis de óxido nítrico, a suplementação de arginina é benéfica para melhorar o desempenho esportivo ou maximizar as adaptações de treinamento para atletas ou indivíduos fisicamente ativos. No entanto, estudos anteriores sobre suplementação com arginina não demonstraram qualquer efeito ou resultados benéficos . Aqui, nosso estudo atual demonstra que a L-arginina, em combinação com L-glutamina, vitamina C, vitamina E, ácido fólico e extrato de chá verde, aumenta o óxido nítrico sérico e aumenta o desempenho esportivo. Encontramos um aumento do teor de proteína total sérica (TP) com suplementação LVFG, sugerindo que os aminoácidos não essenciais L-arginina e L-glutamina estimularam a síntese proteica muscular . No entanto, este aumento no conteúdo de TP não foi refletido como aumento do crescimento muscular em nosso estudo. No entanto, ainda recomendamos que a L-arginina e a L-glutamina sejam adicionadas ao complexo para maximizar as adaptações de treinamento em atletas.

5. Conclusões

no presente estudo, descobrimos que a suplementação de 4 semanas de LVFG aumentou significativamente o peso de morcego nos grupos tratados com LVFG e mostrou efeitos benéficos no perfil lipídico. O desempenho do exercício foi significativamente melhorado no grupo LVFG-2X. Além disso, os parâmetros relacionados com a fadiga induzida pelo exercício, incluindo os níveis de lactato, amoníaco, glucose e CK, foram positivamente modulados através de suplementos de LVFG e dose-dependente para amoníaco, glucose e CK. No que diz respeito aos níveis séricos de óxido nítrico, também descobrimos que a dose de LVFG-2X (1230 mg/kg) pode ser a dose ideal para aumentar os níveis de óxido nítrico. Em conjunto, as conclusões acima sugerem que o LVFG-2x pode ser um potencial auxílio ergogénico para aumentar os níveis de óxido nítrico, aumentar o armazenamento de glicogénio e melhorar o desempenho do exercício. Em conclusão, o LVFG pode ter benefícios diretos para os atletas, melhorando o desempenho esportivo e/ou maximizando adaptações de treinamento.Os valores

são expressos em média ± SEM Para n = 8 ratinhos em cada grupo. Os valores na mesma linha com diferentes letras Sobrescritos (a, b, c) diferem significativamente por uma ANOVA de Sentido Único (). A massa muscular inclui os músculos gastrocnemius e soleus na parte de trás das pernas inferiores. EFP: tecido adiposo epididimal; MTD: tecido adiposo castanho.

Abreviaturas

LVFG: L-arginine, L-glutamine, vitamin C, vitamin E, folic acid, and green tea extract
NO: Nitric oxide
NOS: Nitric oxide synthases
ROS: Reactive oxygen production
NO3−: Nitrate
NO2−: Nitrite
EFP: Epididymal fat pad
BAT: Brown adipose tissue
AST: Aspartate aminotransferase
ALT: Alanine aminotransferase
BUN: Blood urea nitrogen
UA: Uric acid
TC: Total cholesterol
TG: Triacylglycerol
TP: Total protein
iNOS: Inducible nitric oxide synthase.

disponibilidade de dados

os dados utilizados para apoiar os resultados deste estudo estão incluídos no artigo.

aprovação ética

o protocolo animal (IACUC-10514) foi revisto e aprovado pelo Comitê Institucional de cuidados e uso de animais (IACUC) da Universidade Nacional de Taiwan Sport, Taiwan. Esta pesquisa adere às diretrizes da ARRIVE (https://www.nc3rs.org.uk/arrive-guidelines).

Disclosure

Pemey Bio-medical Co., Ltd., não teve papel na concepção, análise ou escrita deste artigo.

conflitos de interesses

todos os autores declaram que não têm conflitos de interesses no que diz respeito ao conteúdo deste artigo.

as contribuições dos autores

Yi-Ming Chen e Yen-Shuo Chiu contribuíram igualmente para este trabalho. YMC, CCH, e YSC projetados experimentos; YMC e YSC realizados os experimentos de laboratório; YMC, HL, CMI, e YSC analisados os dados, interpretados os resultados, preparado figuras, e escreveu o manuscrito; YMC e YSC contribuiu reagentes, materiais e análise de plataformas de e revisou o manuscrito.

agradecimentos

os autores agradecem a Chien-Chao Chiu pela assistência técnica nos exames histológicos. O presente estudo foi apoiado pelo Fundo de cooperação universidade–indústria no. SCRPF3F0161 (Chang Gung University of Science and Technology, Taoyuan, Taiwan).